QICC
中国杭州外泌体由供体细胞的多泡体分泌，呈盘状，直径在30～nm之间，包含蛋白质、脂质、编码RNA、非编码RNA、DNA，能在心肌损伤后传达细胞间信息，是旁分泌因子的重要组成部分。第十一届钱江国际心血管病会议（QICC）上，来自浙江大医院心内科胡新央教授，对外泌体与心肌恢复的关联做了详细阐述。
一、低氧预处理的MSC外泌体在促血管新生中的重要性为验证外泌体对血管新生的作用，设置了灵长类动物实验模型，试验共分三组，分别是对照组DMEM组、常氧状态下的MSC组（N-MSC组)、低氧预处理的MSC组（HP-MSC组）。观察三组模型血管新生的状况。经过17个月的随访调查发现，HP-MSC组左心室射血分数降低幅度最小，效果最好。同样，HP-MSC组心肌梗死面积最小，血管再生情况最佳（P=0.，有统计学差异）。但是值得一提的是，低氧预处理未提高心肌损伤细胞中移植MSC的长期保存，这一现象表明HP-MSC对血管新生的影响是建立在外泌体效应的基础之上的。
为进一步证实外泌体的重要性，在以上实验模型的基础上，对MSC外泌体组加入GW外泌体抑制剂，然后对每组模型的血管再生情况进行分析，结果发现，HP-MSC组相对于其它两组，在新生血管的长度及密度方面均有统计学差异。这一现象进一步证实了心梗之后进行HP-MSC外泌体注射治疗能有效改善心脏状况，减小心肌梗死面积。
二、MSC外泌体在心脏保护中的重要性MSC注射治疗能降低心肌梗死后心肌细胞的自噬水平，这一过程主要通过降低P53、Bnip3基因的表达来实现。对作用过程的进一步研究发现，MSC中的外泌体在影响心肌细胞自噬水平的过程中起主要作用。
以P62、LC3-I、LC3-II为检测指标，设置三个试验组，分别为SHAM组（心肌梗死后注射含外泌体的MSC）、MI+DEMM组（心肌梗死后未进行任何处理）、MI+MSCs组（心肌梗死后进行MSC注射治疗），判断心肌细胞自体吞噬的情况。通过电泳分析法观察各种相关蛋白的含量发现，SHAM组P62含量最高，LC3-I及LC3-II含量最低，降低心肌细胞自体吞噬的能力最优。为进一步证实外泌体的重要性，以上每组中加入BAF-A1抑制剂，使其与未加入抑制剂的组相比，发现加入抑制剂的组LC3类蛋白含量都有所增加即心肌细胞自噬水平有所升高。
体外试验中，经低氧预处理后，MSC能有效抑制心肌细胞中的自噬流。为进一步深入对此现象进行探究，特以P53、Bnip3（促细胞凋亡）的基因表达为检测指标，对SHAM组、MI+DEMM组、MI+MSCs组进行电泳分析，试验结果发现，SHAM组P53、Bnip3基因表达最低，故此认为MSC尤其是含外泌体的MSC能有效降低P53、Bnip3的基因表达，减弱心肌细胞的自噬能力，换而言之，MSC外泌体是通过调控P53、Bnip3的基因表达来影响心肌细胞的自噬情况的。
后期研究观察发现，MSC外泌体的mir-b基因处于高表达的状态，所以推测mir-b基因是影响心肌细胞的自噬状况的主要因素，经实验验证，发现加入mir-b基因抑制剂的组LC3类蛋白含量最高，这一现象验证了以上推测，即MSC外泌体中的mir-b基因能有效降低心肌细胞的自噬水平。
三、总结由于各种组织中的外泌体缺乏质量控制标准，基于外泌体的心肌修复治疗方式的应用目前是受限制的，但可喜的是，研究胞外囊泡的方法论指导方针最近已经颁布，这也意味着MSC注射治疗将会迎来新的发展阶段。
外泌体的来源及应用技术均有达到最佳化的潜能，但在目前的发展过程中仍有一些问题需要注意。譬如，在将外泌体传送到指定细胞的同时应保证细胞的稳定性、完整性及生物功能，同时应注意避免栓塞，注意外泌体的用量。
责任编辑：于晓会
END本文内容为《门诊》杂志原创内容转载须经授权并请注明出处。
门诊新视野｜《门诊》杂志官方
转载请注明地址:http://www.dkhgq.com/zcmbyy/11505.html
